Что точнее пцр или пиф. Анализы на хламидии. Расшифровка анализа на хламидии

Диагноз «хламидиоз» нельзя поставить только по симптомам. Точно определить эту болезнь помогают лабораторные анализы. Почти каждая лаборатория предлагает несколько анализов на хламидиоз. Но как не запутаться в многочисленных методах и точно определить хламидиоз? Рассказываем про каждый из них и разбираемся, в чем плюсы и минусы.

Как можно и как нельзя диагностировать хламидиоз?

У каждого метода есть свои особенности, а некоторые вообще нельзя назвать эффективными. Поэтому давайте выясним, что подходит для определения хламидиоза, а что не стоит принимать всерьез.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Это один из самых надежных анализов на хламидии. Он обнаруживает бактерию с почти 100% точностью.

По присутствию антител, а также по их количеству можно понять: есть ли у человека хламидии и какой стадией хламидиоза (острой или хронической) он болен. Также ИФА помогает определить, удачно ли прошло лечение, если анализ сдают в качестве контрольного.

Важно помнить, что этот способ очень ненадежен. Если есть выбор, лучше воспользоваться более точными методами.

Микроскопия мазка (она же бактериоскопия) по Граму

Этот метод вообще не может обнаруживать хламидий — поэтому очень важно отличать его от других, чтобы не делать бессмысленный анализ.

Микроскопия мазка — это анализ выделений человека (вагинальной слизи, спермы и других) под микроскопом с помощью другого окрашивания — по методу Ганса Грама. Именно его проводят все платные лаборатории под названием «общий мазок», «микроскопия», или «бактериоскопия».

Окрашивание по Граму позволяет увидеть разные бактерии, которые без краски незаметны под микроскопом. Также он помогает посчитать лейкоциты — вид иммунных клеток человека. Но увы: метод Грама не может выявлять хламидий, потому что они просто не окрашиваются таким способом.

Анализ годится только в качестве дополнительного — чтобы оценить общее состояние конкретного органа, или при подозрении на другие заболевания.

Хламидиоз с помощью микроскопии мазка по Граму установить никак нельзя!

Мини-тест (экспресс-тест на хламидии)

Этот метод полностью бесполезен. Про него стоит знать, только чтобы не выкидывать деньги на ветер.

Анализ можно купить в аптеке и провести самостоятельно в домашних условиях. По механизму действия он очень схож с тестом на беременность: в лунку наносится несколько капель мочи или слизи из вагины, затем результат оценивают по числу полосок.

В инструкции говорится, что, если у человека есть хламидии, тест покажет две полоски.

Однако отрицательный результат теста совсем не гарантирует, что болезни нет на самом деле. Положительный, впрочем, тоже недостоверен. По сути, анализ не сообщает ничего полезного. Поэтому при подозрении на хламидиоз разумнее сдать более точные анализы.

В качестве итога рассмотрим сравнительную таблицу всех анализов на хламидиоз:

	Достовер-	Материал	Цена*
ПЦР		Мазок или соскоб, моча	В крови могут содержаться и косвенные признаки хламидий — антитела к ним; а иногда — и сами хламидии, если инфекция попала в кровоток. Специальной подготовки, чтобы сдать анализ крови на хламидии не требуется. Правильнее всего сдавать кровь на голодный желудок, или хотя бы спустя 4 часа после еды. Антитела исследуются с помощью ИФА , а сами хламидии — с помощью ПЦР . Если в крови обнаружены сами хламидии — важно понимать, что это серьезное состояние. Из кровотока бактерии могут попасть в любой орган, где есть слизистые оболочки, и начать там размножаться. Как подготовиться к анализу на хламидии? Чтобы результаты анализов были достоверны, требуется не только опыт врачей и лаборантов, но и ответственность самих пациентов: есть правила, которые нельзя нарушать. Рассмотрим, как правильно сдавать кровь на хламидиоз и как подготовиться к мазку на хламидии женщинам (в том числе беременным) и мужчинам. Обследование на хламидиоз нужно проводить до того, как человек начал принимать антибиотики. Причина в том, что антибактериальные препараты убивают хламидий или «загоняют» в скрытую форму. Значит, обнаружить бактерии после такого лечения будет очень трудно. Если человек принимал любые антибиотики за несколько дней до сдачи анализов (например, лечил ангину), то первый тест рекомендуется сдавать только через месяц после приема последней таблетки. Если пациент ранее лечился местными антибактериальными препаратами (мазями, кремами, растворами антисептиков), то первый анализ рекомендуется сдавать только через 2 недели после лечения. Cдавать материал из мочеиспускательного канала (слизь/мочу) как мужчинам, так и женщинам нужно либо до мочеиспускания, либо через 3 часа после него. Анализ на хламидиоз у женщин проводят между менструациями: не позже, чем за 5 дней до менструации, или не раньше, чем через 5 дней после нее. Желательно, чтобы материал для анализа брали в первую половину цикла. Однако, если у женщины есть признаки сильного воспаления, то имеет смысл сдать анализ как можно быстрее, исключая только период самой менструации. За день до анализа нельзя проводить никакие спринцевания влагалища. УЗИ), мужчинам — в уретру. Беременные женщины сдают анализы по тем же правилам, что и женщины, не ожидающие ребенка. Разумеется, на них не распространяются ограничения, связанные с менструальным циклом. В каких случаях проверяются на хламидиоз: основные показания Основными причинами, по которым человеку стоит сдать анализы на хламидиоз, являются: острое или хроническое воспаление: мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища, прямой кишки, конъюнктивы глаза, ротоглотки, легких (пневмония или бронхиолит — у детей); подозрение на бытовое или половое заражение хламидиозом — даже если симптомов при этом нет (бессимптомная форма); беременность, при ее осложнениях: воспаления шейки матки, влагалища, мочеиспускательного канала, при болях в животе. более серьезные проблемы с беременностью: выкидыш, замершая беременность, другие выкидыши в прошлом; бесплодие. Примеры настоящих анализов Когда все результаты анализов приходят положительными, поставить диагноз нетрудно. Но как быть, если они противоречат друг другу? Строгих схем для диагностики хламидиоза нет. Чтобы правильно поставить диагноз, разные врачи используют разные методы и их сочетания. Для наглядности рассмотрим примеры диагнозов у реальных пациентов: Среди большого разнообразия лабораторных методов важно знать, как правильно провериться на хламидиоз. Пожалуй, основное правило: к диагностике хламидиоза нужно подходить комплексно — использовать несколько видов анализов и сопоставлять их результаты. Также помните, что оценивать результаты анализов, как и назначать лечение, должен только врач. Из существующих анализов разумнее выбирать самые точные — ПЦР , ИФА и бактериальный посев. Те же анализы хорошо подойдут и для оценки результатов лечения. Главное — помнить, что ПЦР нет смысла сдавать раньше, чем через месяц после курса антибиотиков.

Эти методы основаны на обнаружении антигенных субстанций хламидий в эпителии и других тканях путем обработки препаратов специфическими антителами. Антитела диагностической антихламидийной сыворотки соединены с какой-либо меткой -- люминесцирующей (ФИТЦ-антитела) или ферментной (энзим-меченые антитела).

Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ)

Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. При люминесцентной микроскопии включения хламидий определяются в виде зеленой или желто-зеленой флюоресценции включений на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток. Включения могут иметь зернистую гомогенную или смешанную структуру.

Показания:

1. Острая фаза заболевания.
2. Хроническая фаза заболевания.
3. Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
4. Беременность с отягощенным акушерским анамнезом.
5. Бесплодие неясного генеза.

Диагностическая информативность ПИФ связана с тем, что с ее помощью выявляются не только корпускулярные, но и растворимые антигены хламидий. Этот метод не зависит от возможного изменения тинкториальных свойств микроорганизма в процессе заболевания и лечения.

ПИФ-метод является важнейшим скриннинговым методом диагностики урогенитального хламидиоза.

Его чувствительность и специфичность при использовании моноклональных антител составляет соответственно 65-90% и 85-90%.

При оценке результатов следует учитывать, что только показатели внутриклеточной флюоресценции могут оцениваться в качестве положительного результата этого теста при использовании поликлональных антихламидийных антител, при использовании моноклональных -- результат считают при наличии 10 ЭТ в пользе зрения.

Cоскобные препараты готовят также, как и для цитоскопических исследований.

Методика:

Выпускают диагностические наборы, содержащие моноклональные антитела для ПИФ, следующие фирмы: Syva, Difco, Kallastad, Bartrels, Boots celltech, California Integrated Diagnostics, Orion Diagnostica. Реагенты фирм Syva, Difco, Kallastad представляют собой меченные ФИТЦ моноклональные антитела к основному белку наружной мембраны хламидий, а реагенты других фирм -- моноклональные антитела к родоспецифическому хламидийному липолисахариду (ЛПС). В России ЗАО “НИАРМЕДИК плюс” при НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН выпускает моноклональные антитела к ЛПС хламидий, которые успешно конкурируют с продукцией иностранных фирм по качеству продукции. Это набор “Хламоноскрин” для определения моноклональных антител к родоспецифическому липополисахаридному антигену и набор “Хламоноскрин-2” для определения моноклональных антител к видоспецифическому белковому антигену хламидии трахоматис. Наборы имеют ФС 42-359598 и регистрационное удостоверение Минздрава России 93/270/9.

Моноклональные антитела отличаются друг от друга по вызываемой яркости свечения, постоянству выявляемых форм ЭТ и степени специфичности. Для диагностики хламидий этим методом необходим люминесцентный микроскоп.

Применение:

В целом, метод ПИФ отвечает критериям высокой чувствительности и специфичности, но требует исполнения опытным, компетентным лабораторным работником.

Высококвалифицированная экспертная оценка методом ПИФ редко бывает доступной, поэтому средняя чувствительность его снижается. Метод недостаточно чувствителен и для стабильного определения малых количеств ЭТ. К тому же невозможно проверить и отрицательные результаты, и, следовательно, обнаружить среди них ложноотрицательные, что приводит к снижению чувствительности.

Непрямой метод иммунофлюресценциии

Непрямой метод иммунофлюресценции применяют в тех случаях, когда нет в наличии ФИТЦ-конъюгата антихламидийных антител. В этих случаях приготовленный тем же методом, что и для ПИФ препарат из клинических проб обрабатывают вначале антихламидийными антителами, полученными путем иммунизации хламидиями овец, кроликов, мышей или других животных, а затем второй сывороткой, специфичной для вида животного, которое было иммунизировано хламидиями. Антитела второй сыворотки конъюгированы с ФИТЦ. Показания к применению и специфичность данного метода совпадают с ПИФ.

Хламидийная инфекция вызывается Chlamydia trachomatis – грамотрицательной бактерией, принадлежащей семейству Chlamydiaceae . Вид Chlamydia trachomatis включает различные серовары, которые вызывают отдельные нозологические формы заболеваний. Сероваровы A, B, C вызывают трахому, L1, L2, L3 – венерическую лимфогранулему. Наибольшее распространение в странах Европы, Южной и Северной Америки и в России получили серовары D–K, которые передаются при половых контактах и вызывают урогенитальную хламидийную инфекцию (УХИ). Возможна перинатальная передача с развитием у новорожденных конъюнктивита или пневмонии. C.trachomatis имеет уникальный среди других возбудителей ИППП жизненный цикл. Инфицирование эпителиальных клеток происходит метаболически неактивными формами хламидий – элементарными тельцами (ЭТ). Внутри клеток ЭТ трансформирутся в ретикулярные тельца (РТ) – метаболически активные, делящиеся формы. Накопление внутри эпителиальных клеток новых генераций РТ и их параллельная трансформация обратно в ЭТ истощает ресурсы клеток хозяина, приводя их к гибели, высвобождению ЭТ и новому циклу инфицирования. Неосложненная хламидийная инфекция протекает у мужчин чаще всего в форме уретрита, у женщин – в форме слизисто-гнойного цервицита. Симптомы и проявления УХИ неспецифичны, для постановки диагноза УХИ необходимы лабораторные исследования для выявления возбудителя или его маркеров. Значительная часть случаев УХИ – от 40 до 60% протекает в бессимптомной или малосимптомной форме и проявляется уже на стадии осложнений. Основными осложнениями УХИ являются: эпидидимит, эндометрит, сальпингит, сальпингоофорит, внематочная беременность, трубное бесплодие, болезнь Рейтера.

Показания к назначению лабораторных исследований. У мужчин: наличие симптомов и клинических проявлений уретрита, эпидидимита или эпидидимоорхита; у лиц, практикующих аногенитальные контакты – проктита; при физикальном осмотре – наличие выделений из уретры.

У женщин: наличие симптомов воспалительного процесса в нижних отделах урогенитального тракта и органах малого таза, боли в низу живота, патологические выделения из влагалища; наличие слизистых или слизисто-гнойных выделений из цервикального канала, нарушение менструального цикла, болезненность при половых контактах; подготовка к хирургическому вмешательству на органах малого таза; подготовка к беременности, отягощенный акушерско-гинекологический анамнез, связанный с инфекционной патологией.

У лиц обоего пола без симптомов и признаков воспалительного процесса урогенитального тракта: наличие перечисленных выше симптомов и признаков или установленная УХИ у полового партнера; в возрастной группе до 25 лет – многочисленные половые партнеры или половые контакты с новым половым партнером без барьерной контрацепции.

Дифференциальная диагностика. Гонорея, урогенитальный трихомониаз, инфекция, вызванная M.genitalium .

Этиологическая диагностика включает визуальное обнаружение C.trachomatis , выделение культуры C.trachomatis , выявление АГ, ДНК и РНК C.trachomatis и АТ к микроорганизму.

Материал для исследований

• Мазки/соскобы со слизистых оболочек цервикального канала и уретры женщин – микроскопические исследования, культуральные исследования, выявление АГ, обнаружение ДНК, РНК;
• мазки/соскобы со слизистой влагалища, мазки (соскобы) со слизистой прямой кишки – выявление ДНК, РНК;
• мазки/соскобы с конъюнктивы глаз – культуральные исследования, выявление ДНК;
• моча (у мужчин) – выявление ДНК;
• сыворотка крови – выявление АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для визуального выявления C.trachomatis возможно применение световой или люминесцентной микроскопии. При применении световой микроскопии используется фиксированный препарат биологического материала, окрашенный по Романовскому- Гимзе, в котором выявляют измененные клетки цилиндрического эпителия, содержащие ЭТ и РТ C.trachomatis , получившие название телец ГальберштедтераПровачека. Диагностическая чувствительность исследования не превышает 10%. Распространенным приемом выявления хламидий является определение АГ микроорганизма методом ПИФ. С помощью люминесцентной микроскопии в препарате, обработанном флуоресцентно-меченными АТ к хламидиям, по характерному свечению обнаруживаются ЭТ C.trachomatis . Микроскопические исследования, в первую очередь ПИФ, достаточно просты в исполнении и не требует дорогостоящего оборудования, однако весьма требовательны к качеству полученного биологического материала, технике нанесения препарата на стекло и специфичности используемых АТ. Материал для выполнения ПИФ должен содержать достаточное количество клеток цилиндрического эпителия, его получают из цервикального канала (по показаниям – из уретры) и у мужчин из передней уретры. Для интерпретации результата необходимо наличие в препарате не менее 5–10 клеток цилиндрического эпителия (отражает качество получения биоматериала) в поле зрения и не менее 10 флуоресцирующих ЭТ. Диагностическая чувствительность метода ПИФ варьирует в широких пределах – от 10 до 65%. Максимальная чувствительность и специфичность метода отмечена у пациентов с клиническими проявлениями инфекции и высокой бактериальной нагрузкой, минимальная – при бессимптомных или малосимптомных формах.

Для культивирования C.trachomatis в условиях in vitro используются чувствительные к микроорганизму эукариотические клеточные линии – HeLa, McCoy, L-929, в которых происходит развитие хламидий. В процессе исследования ЭТ, содержащиеся в биологическом материале, инфицируют чувствительные клетки культуры и размножаются в них. Через 48–72 часа после заражения в культуре накапливаются клетки, содержащие включения – размножившиеся РТ и ЭТ. Результат культурального исследования оценивается визуально при использовании метода ПИФ с помощью люминесцентной микроскопии. Культуральный метод долгое время рассматривался в качестве «золотого стандарта» диагностики, поскольку обладал большей чувствительностью по сравнению с методом световой микроскопии и иммунологическими методами при практически 100% специфичности. Однако эффективность метода в значительной степени зависит от состояния используемой клеточной линии – ее жизнеспособности и восприимчивости к инфицированию хламидиями, на которые могут оказывать негативное влияние продукты жизнедеятельности, содержащиеся в биологическом материале, антибиотики, местные бактерицидные препараты, химические компоненты урогенитальных зондов и тампонов, и др. Другим важным условием является сохранение жизнеспособности самих хламидий в исследуемом биологическом материале. Диагностическая чувствительность метода с учетом указанных выше факторов варьирует от 40 до 85%.

Для выявления АГ C.trachomatis за рубежом был разработан ряд тестов на основе ИФА. Диагностическая чувствительность выявления АГ C.trachomatis находится в пределах 55–78%. Указанные тесты получили широкое распространение в зарубежной лабораторной практике, однако в РФ не применяются.

Выявление АТ классов IgA, IgM и IgG к АГ C.trachomatis в крови осуществляется методами МИФ или ИФА. Метод МИФ рассматривается как «золотой стандарт » определения АТ к АГ хламидий, он позволяет проводить серотипирование. При определении АТ IgM МИФ обладает большей чувствительностью, чем ИФА, что важно при диагностике хламидийной инфекция у новорожденных. Однако исследование достаточно трудоемко и требует дорогостоящих высокоочищенных АГ C.trachomatis , поэтому метод ИФА получил наибольшее распространение в международной и отечественной практике Выявление АТ IgA может свидетельствовать о наличии острой или обострении хронической инфекции. Для правильной оценки результатов определения АТ с помощью ИФА необходимо учитывать несколько важных условий. При неосложненной УХИ основную роль играет местное звено иммунной системы с участием специфических и неспецифических факторов. На сроки появления и уровень циркулирующих в крови АТ влияют индивидуальная иммунологическая реактивность организма, сроки инфицирования, продолжительность инфекции, повторные случаи инфицирования, уровень бактериальной нагрузки и целый ряд других факторов. Поэтому АТ в крови могут появляться в срок от нескольких недель до нескольких месяцев после инфицирования. Элиминация АТ может происходить в течение нескольких лет или же сохраняться практически на всю жизнь.

Для выявления ДНК C.trachomatis в РФ используют преимущественно ПЦР с различными вариантами детекции продуктов реакции и метод выявления РНК C.trachomatis на основе НАСБА. Диагностическая чувствительность метода ПЦР для диагностики УХИ находится в пределах от 90 до 98%, специфичность достигает 96–98%. Диагностическая чувствительность метода НАСБА достигает 98%, диагностическая специфичность – до 100%.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Микроскопическое исследование препаратов с окраской по Романовскому-Гимзе в настоящее время не используется и не рекомендуется для диагностики УХИ. В то же время, всем пациентам с симптомами и клиническими проявлениями урогенитальной инфекции показано микроскопическое исследование с окраской по Граму для установления лабораторных признаков воспаления (повышенное содержание ПМЯЛ).

Применение метода ПИФ целесообразно в качестве метода быстрой диагностики при наличии у пациентов выраженных проявлений инфекционно-воспалительного процесса в урогенитальном тракте при условии соблюдения всех требований получения биологического материала. Метод не подходит для скрининга, диагностики хронических форм хламидийной инфекции, контроля лечения и исследования образцов мочи и слизистой влагалища, прямой кишки, ротоглотки.

С учетом того, что для проведения культурального исследования необходима технология ведения эукариотических клеточных линий и соответствующие для этого лабораторные условия, то применение метода в рутинной лабораторной практике ограничено. Метод в первую очередь имеет большое значение в научных исследованиях, когда требуется выделить живой возбудитель для его дальнейшего изучения.

Определение АТ к C.trachomatis может быть использовано для эпидемиологических исследований, с целью интегральной оценки доли лиц в популяции, контактировавшей с C.trachomatis . В клинической практике определение АТ показано при ретроспективном анализе возможной хламидийной этиологии при бесплодии, длительных хронических воспалительных процессах урогенитального тракта. Однако и в этом случае положительные результаты обнаружения АТ должны рассматриваться в контексте других клинических, анамнестических и лабораторных данных.

В настоящее время выявление ДНК методом ПЦР считаются основой лабораторной диагностики УХИ. Исследование показано и для контроля результатов лечения. При использовании метода ПЦР с учетом скорости элиминации ДНК C.trachomatis контроль лечения необходимо проводить не ранее 3–4 недель. РНК возбудителя является более ранним маркером ответа на терапию, поэтому с помощью метода НАСБА можно оценивать эффективность лечения через 1–2 недели после окончания курса.

Особенности интерпретация результатов лабораторных исследований. Результаты, полученные методом ПИФ, рекомендуется подтверждать с помощью культурального или молекулярно-биологических методов.

Положительные результаты культурального исследования не требуют дополнительного подтверждения и означают наличие инфекции. Отрицательный результат означает как отсутствие возбудителя, так и может свидетельствовать о неоптимальных условиях для его культивирования.

При обнаружении ДНК C.trachomatis у пациентов с клинической симптоматикой урогенитальной инфекции или наличии факторов, способствующих инфицированию, дополнительного исследования не требуется, диагноз урогенитальной инфекции считается установленным. У пациентов, у которых обнаружена ДНК C.trachomatis , но отсутствуют субъективные и объективные признаки инфекционно- воспалительного заболевания и факторы риска, для подтверждения диагноза рекомендуется провести исследование для выявления РНК C.trachomatis методом НАСБА. Наличие ДНК и РНК патогена является объективным лабораторным признаком инфекции.

При оценке результатов выявления АТ следует учитывать, что их наличие или отсутствие не отражает наличие или отсутствие инфекции в данный момент времени.

Информативные и достоверные результаты в диагностике хламидиоза дают лабораторные анализы. В МЖЦ вы можете сделать анализ крови на хламидии lgA + lgG. Цена услуги – 700 рублей.

Цены на диагностику хламидиоза*

Методы диагностики хламидиоза

Диагностировать хламидиоз по симптомам достаточно сложно, поэтому заболевание чаще всего обнаруживается в процессе обследования на другие половые инфекции и гинекологические болезни. Получение достоверных результатов возможно только на основе комплексной лабораторной диагностики. Материалом для исследования служит венозная кровь, мазок из влагалища, шейки матки, соскоб.

Основные методы:

• мазок;
• бакпосев.

Иммуноферментный анализ крови (ИФА) позволяет определить стадию хламидиоза по наличию антител Igg, Igm, Iga. На начальном этапе заболевания в крови появляются антитела Igm. Если хламидиоз прогрессирует, то подтвердят наличие антител Iga. В хронической форме в крови присутствуют компоненты Igg.

В ходе анализа полимеразной цепной реакции (ПЦР) обнаруживается ДНК возбудителя. Это достоверное исследование, которое информативно даже в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.

Специалисты

Когда и как сдавать анализы на хламидии

Назначение и отбор материалов для анализа делает врач. Поводом для проведения лабораторной диагностики могут стать жалобы на боли в области малого таза, выделения, сведения об инфицировании партнёра и незащищённом сексе.

При длительном бесплодии и самопроизвольном прерывании беременности женщине рекомендуется в первую очередь подтвердить или исключить инфицирование Chlamidiya trachomatis.

• за неделю прекратить использование местных лекарственных средств (вагинальных свечей, таблеток);
• за три дня отказаться от использования средств интимной гигиены;
• за два дня прекратить половые связи.

Чтобы обеспечить достоверность материала, накануне обследования не нужно спринцеваться и подмываться.

Кровь для анализа берётся утром натощак. Мазок – на день после окончания менструации.

Максимально достоверный результат может быть получен только после проведения нескольких анализов. В отдельных случаях исследования проводятся повторно, и только после этого устанавливается диагноз.

Расшифровка анализа на хламидии

ПЦР-диагностика хламидиоза расшифровывается по двум значениям: положительно или отрицательно. Более подробные сведения даёт ИФА-анализ – по количеству антител определённого вида можно судить о прогрессировании инфекционного процесса ил выздоровлении.

При определении стадии хламидиоза доктор пользуется стандартными количественными сетками – титрами. Например, при хронической форме заболевания результаты анализа находятся в границах таких показателей:

• IgA до 50;
• IgG 100-1600;
• IgM 50-200.

Об улучшении ситуации говорят цифры:

• IgA до 50;
• IgG 100-400;
• IgM до 50.

Где сдать анализы на хламидиоз в Москве

Для получения точных результатов исследования на хламидии должны проводиться в специальных условиях, компетентными диагностами. МЖЦ оснащён собственной лабораторией, где обследование и расшифровку выполняют квалифицированными врачами.

Чтобы записаться на лабораторную диагностику, достаточно связаться с нами по телефону или заполнить форму обратной связи.

… по разным данным, от 5 до 15 % молодых сексуально активных людей поражены хламидийной инфекцией .

ВВЕДЕНИЕ

Хламидии (Chlamydia ) - мелкие грамотрицательные кокковидные бактерии размером 250-1500 нм (0,25-1 мкм). Они имеют все основные признаки бактерий: содержат два типа нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), рибосомы, мурамовую кислоту (компонент клеточной стенки грамотрицательных бактерий), размножаются бинарным делением и чувствительны к некоторым антибиотикам. Семейство Chlamydiaceae (входящее в порядок Chlamydiales ) является облигатными внутриклеточными бактериями, которые имеют две формы жизни (элементарные и ретикулярные тельца), сходный двухфазный цикл развития (состоящий из чередования различных форм - элементарного тельца и ретикулярного тельца), обладают склонностью к персистенции (или к латентному (скрытому) существованию).

Согласно новой международной классификации имеется четыре семейства и 5 родов хламидий. В каждом роде представлено от одного до шести видов, отличающихся между собой по ряду фенотипических признаков. Каждый вид имеет не только свое место в классификации, но также имеет свои патогенные потенции, требующие особого терапевтического подхода.

Рассмотрим наиболее значимые (патогенные) для человека виды хламидий (не погружаясь в эту тонкую и сложную классификацию). (1) Chlamydia psittaci : вызывает у человека атипичную пневмонию, энцефаломиокардит, артрит, пиелонефрит, энцефаломиокардит (эта хламидия является абсолютным зоонозом, то есть, инфекция передается человеку от животного; пути передачи воздушно-капельный и воздушно-пылевой). (2) Chlamydia pneumonia (абсолютный антропоноз - передается человеку исключительно от больного или инфицированного человека, заражение человека происходит воздушно-капельным путем и воздушно-пылевым путем): вызывает у взрослых острые респираторные заболевания, в частности бронхиты и мягкую форму пневмонии, имеющих тенденцию к хронизации процесса. (3) Chlamydia trachomatis (в ней выявлены 18 антигенных серотипов): встречается только у человека и вызывает широчайший спектр болезней, включая урогенитальные заболевания, конъюнктивиты, некоторые формы артритов (серотипы хламидий, вызывающие поражение урогенитального тракта передаются от человека к человеку при половом контакте).

Особенностью хламидий является то, что они развиваются только в эпителии особого типа, в так называемом призматическом (цилиндрическом) эпителии, поэтому поражаются органы, покрытые этим эпителием. Chlamydia pneumonia и Chlamydia psittaci, поражая эпителий дыхательных путей, прежде всего бронхов, вызывают хронические, реже острые, бронхиты и пневмонии («воспаление лёгких»). Chlamydia trachomatis же, повреждая слизистую оболочку уретры, канала шейки матки, маточных труб приводит не только к острым воспалительным процессам, но и к хронизации с последующими осложнениями, наиболее грозным из которых является бесплодие

Многочисленные клинико-эпидемиологические исследования свидетельствуют о широком распространении хламидийной инфекции . Сегодня хламидийная инфекция прочно заняла второе место после пневмококка в спектре возбудителей пневмоний, которые нередко имеют тенденцию к хронизации и тяжелому течению с летальными исходами. 50–80% случаев нарушения репродуктивной функции у женщин обусловлены инфекционными поражениями, среди которых хламидийные встречаются наиболее часто.

Клиническую диагностику хламидиоза затрудняют длительное бессимптомное течение, нехарактерные клинические проявления, неэффективность иммунохимических и серологических методов анализа, дороговизна, длительность и трудоемкость микробиологического метода.

ТЕХНИКА ВЗЯТИЯ МАТЕРИАЛА

Прежде чем рассматривать методы лабораторной диагностики хламидийной инфекции, необходимо рассмотреть технику взятия материала, поскольку данная процедура входит один из самых ответственных этапов диагностики хламидиоза – этап забора материала.

При исследовании на хламидии методом заражения культуры клеток перед взятием материала больные не должны принимать в течение месяца антибиотики тетрациклинового ряда; при цитологической методике, в том числе и при использовании моноклональных флюоресцирующих антител, антибиотики не следует применять за две недели до исследования. Перед взятием материала из уретры больные не должны мочиться в течение 1-1,5 часа.

При взятии материала на хламидии следует помнить , что оптимальным для присутствия и размножения хламидий являются определенные участки цилиндрического эпителия мочеполовых путей (передняя уретра на глубине 2,5-4 cм у мужчин, слизистая оболочка цервикального канала матки на глубине 1,5 см у женщин). При взятии материала из шейки матки ключевым моментом является удаление слизистой пробки. От тщательности проведения этой подготовительной процедуры во многом зависит правильность соскоба клеток цервикального канала. Слизистую пробку удаляют ватным тампоном и пинцетом, а затем берут материал специальной щеточкой cervex brush или voba-brush, имеющей ряд преимуществ, так как для получения репрезентативного результата важно присутствие в образце клеток со всей поверхности цервикального канала, зоны трансформации. Достаточно информативным является исследование у мужчин осадка первой порции утренней мочи методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Забор материала у девочек производится со слизистой оболочки преддверия влагалища, в отдельных случаях - из заднего свода влагалища через гименальные кольца. Объектом исследования на наличие хламидий могут быть смывы со слизистой оболочки глаз, носоглотки, мокрота, бронхоальвеолярный смыв.

ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ

Цитоскопические методы . При цитоскопическом методе одновременно с поиском цитоплазматических клеток-включений Гальбершедтера-Провачека учитывается количество лейкоцитов как показателя воспаления, а также дополнительная информация о наличии сопутствующей бактериальной микрофлоры, дрожжеподобных грибов, трихомонад и т.п. Цитоскопический метод широко доступен, но эффективен лишь при острых формах инфекции, значительно менее эффективен и информативен при хронических формах заболевания.

Иммуноморфологические методы . Эти методы основаны на обнаружении антигенных субстанций хламидий в эпителии и других тканях путем обработки препаратов антителами. Антитела диагностической антихламидийной сыворотки соединены с какой-либо меткой - люминесцирующей (ФИТЦ-антитела) или ферментной (энзим-меченые антитела).

Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ). Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. При люминесцентной микроскопии хламидийные включения определяются в виде образований в клетке эпителия с зеленой или желто-зеленой флюоресценцией на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток. Включения могут иметь зернистую, гомогенную или смешанную структуру. Диагностическая информативность ПИФ связана с тем, что с ее помощью выявляются не только корпускулярные, но и растворимые антигены хламидий.

Непрямой метод иммунофлюоресценции . Непрямой метод иммунофлюоресценции применяют в тех случаях, когда нет в наличии ФИТЦ-конъюгата антихламидийных антител. В этих случаях приготовленный тем же методом, что и для ПИФ препарат из клинических проб обрабатывают вначале антихламидийными антителами, полученными путем иммунизации хламидиями овец, кроликов, мышей или других животных, а затем второй сывороткой, специфичной для вида животного, которое было иммунизировано хламидиями. Антитела второй сыворотки конъюгированы с ФИТЦ.

Методы иммуноферментного анализа . Эти методы основаны на обнаружении растворимого антигена хламидий в исследуемых пробах. Чаще всего в клинической практике применяются наборы реагентов, основанные на методе твердофазного ИФА-анализа для определения антигенов хламидий. Твердая фаза покрыта хламидийными моноклональными антителами установленной специфичности. Амплификация достигается с использованием технологии полимерной конъюгации, в результате чего происходит фиксация, при которой на каждый связанный участок антигена приходится полимерный комплекс с высокомолекулярным фрагментом. Кроме того, амплификация выполняется на стадии обозначенного воспроизведения с использованием запатентованной технологии фермент-амплификации. Визуально положительные пробы окрашиваются в желто-оранжевый цвет. Интенсивность окраски пропорциональна количеству антигена хламидии. Точный результат исследования определяют с помощью специальных аппаратов для ИФА.

Выделение хламидий в культуре клеток МсСоу . Одним из лучших, но в то же время наиболее трудоемким, является метод диагностики хламидий путем выделения возбудителя в культуре клеток, обработанных различными антиметаболитами («золотой стандарт»). Для этой цели обычно используют чувствительную культуру клеток, обработанную циклогексимидом. Чувствительность культурального метода по сравнению с ПЦР составляет 70-80%, но в то же время он превосходит молекулярно-биологические методы диагностики по специфичности.

Культуральный метод является референс-методом при оценке эффективности антибактериального лечения. При исследовании биопроб методом ПЦР после курса химиотерапии в некоторых случаях можно получить «ложноположительные с клинической точки зрения» результаты. Это связано с тем, что невозможно однозначно оценить жизнеспособность и патогенность микробной клетки на основании выявления фрагмента ее генома, используя только данные молекулярно-биологических методов. В этом случае при исследовании клинического материала с помощью культурального посева микробные клетки, потерявшие эти важные с клинической точки зрения свойства, не дадут роста в клеточной культуре.

Диагностика методом полимеразой цепной реакции (ПЦР). Экстремально высокие показатели чувствительности и специфичности ПЦР делают эту методику во многом революционной в лабораторной диагностике, но, несмотря на это, особое внимание при его использовании следует уделять, без сомнения, вопросам правильной интерпретации получаемых результатов. Основными мишенями при выявлении хламидии трахоматис методом ПЦР являются нуклеотидная последовательность видоспецифической криптической плазмиды, последовательность генома главного белка внутренней мембраны, рибосомальные гены.

По сравнению с широко применяющимися иммунологическими тестами ПЦР-диагностика обладает рядом преимуществ: (1) высокая и регулируемая специфичность, обусловленная лишь нуклеотидной последовательностью, применяемой в данной диагностической системе; (2) высокая чувствительность, позволяющая диагностировать не только острые, но и латентные инфекции (возможно выявление даже единичных бактерий или вирусов); (3) химическое сходство всех нуклеиновых кислот позволяющих разрабатывать универсальные процедуры для выявления различных инфекционных агентов; (4) возможность идентификации возбудителя в течение 4,5-5 часов.

Обратите внимание . В настоящее время не существует лабораторного метода, позволяющего избежать как ложноположительных, так и ложноотрицательных результатов. При диагностике хламидиоза необходима комплексная лабораторная диагностика (ПИФ, ИФА, культуральный метод, ПЦР, выявление титров антител к антигенам возбудителя), позволяющая выявить возбудителя, определить стадию заболевания, обосновать необходимость назначения антибактериальных препаратов. Изучение иммунного статуса и обоснованное применение иммуномодуляторов позволит повысить эффективность лечения в отдаленные после заражения сроки.